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如何避免細胞污染?

更新時間:2024-01-16點擊次數(shù):1093
  你知道在細胞培養(yǎng)實驗中該如何避免污染嗎?讓我們一起來看看吧!
 
  一、培養(yǎng)環(huán)境:
 
  1)無菌室:保持清潔,經(jīng)常擦洗,使污染物不易積聚。
 
  2)超凈臺
 
  ①定期維護和保養(yǎng),按廠家規(guī)定定期清洗和更換空氣濾器,經(jīng)常保持清潔并用75%乙醇消毒;
 
  ②操作前提前30 min啟動超凈臺紫外燈消毒;
 
  ③存放的物品應(yīng)全面消毒,并盡可能只將立即使用的物品放入;
 
  ④細胞培養(yǎng)操作時應(yīng)盡量保持層流,避免氣霧狀污染物進入培養(yǎng)器皿;
 
  ⑤操作中濺出的液體應(yīng)及時擦去,并用75%乙醇擦拭消毒;
 
  ⑥實驗完畢后,移走所有物品,并用75%乙醇擦洗工作臺。
 
  二、物品的消毒滅菌
 
  ①操作前應(yīng)做好所用器皿、試劑的消毒滅菌工作;
 
  ②高壓蒸汽滅菌是常用的方法,不能采用此法滅菌的器皿、試劑,應(yīng)采用其他消毒滅菌方法,如培養(yǎng)基等試劑可過濾除菌,蓋玻片等器械可用75%乙醇浸泡消毒后置于無菌環(huán)境中晾干;
 
  ③若物品消毒滅菌后長時間未使用,應(yīng)重新處理。
 
  三、無菌操作
 
  防止污染的關(guān)鍵在于嚴(yán)格無菌操作。無菌意識不強、動作不準(zhǔn)確、操作不熟練等都會造成污染。注意事項主要如下:
 
  ①細胞培養(yǎng)的操作一定要在超凈臺等層流裝置內(nèi)進行,無菌的試劑、器械一定要在無菌區(qū)開封;
 
  ②操作時減少交談、咳嗽等防止來自唾沫和呼出氣流造成的污染;
 
  ③培養(yǎng)試劑不宜過早開瓶,操作時應(yīng)盡可能保持瓶體傾斜,所有瓶口不能與超凈臺的風(fēng)向相逆,使用后應(yīng)立即封閉瓶口;
 
  ④培養(yǎng)的細胞處理前也不要過早暴露于空氣中;
 
  ⑤不要在打開器皿上方操作;
 
  ⑥不允許用手觸及器皿的無菌部分(如瓶口、瓶蓋內(nèi)側(cè))。
 
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